Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒 Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒操作說(shuō)明：
一．微孔酶標(biāo)儀法
1. *溶解蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，取10ul，稀釋250ul ，使終濃度為0.2mg/ml。待測(cè)蛋白樣品在什么溶液中，標(biāo)準(zhǔn)品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡(jiǎn)便起見(jiàn)，也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
2. 5×G250染色液使用前請(qǐng)顛倒3-5次混勻，取1ml 5×G250染色液，加入4ml雙蒸水，混勻成1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。
3. 將標(biāo)準(zhǔn)品按0,2,4,6,8,12,16,20微升分別加到96孔板中，加PBS稀釋液補(bǔ)足到20微升。
4. 將樣品作適當(dāng)稀釋（好多做幾個(gè)梯度，如作2倍、4倍、8倍稀釋），加20微升到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時(shí)的誤差，標(biāo)準(zhǔn)線前面的點(diǎn)可能不很準(zhǔn)確，所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線1/2后。
5. 各孔加入200微升稀釋后的1×G250染色液，室溫放置3-5分鐘。
6. 用酶標(biāo)儀測(cè)定A595，或560-610nm之間的其它波長(zhǎng)的吸光度。
7. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中的蛋白濃度。 |
