本產(chǎn)品是一種具有細(xì)胞通透性的X-rosamine衍生物(Chloromethyl-X-rosamine,簡(jiǎn)稱CMXRos),能夠特異性地標(biāo)記細(xì)胞中具有生物活性的線粒體,檢測(cè)線粒體膜電位。本產(chǎn)品為高純度探針,兼容后續(xù)的細(xì)胞固定和通透,但染色后再固定和通透,熒光強(qiáng)度會(huì)有一定程度的下降。 本產(chǎn)品是一種氧化型的紅色熒光染料,只需簡(jiǎn)單地和細(xì)胞孵育,即可通過(guò)被動(dòng)運(yùn)輸穿過(guò)細(xì)胞膜,并借助本探針含有的弱巰基反應(yīng)性的氯甲基(mildly thiol-reactive chloromethyl)官能團(tuán)特異性地標(biāo)記有生物活性的線粒體。本探針含有的弱巰基反應(yīng)性的氯甲基,可以和線粒體內(nèi)蛋白的巰基反應(yīng)并共價(jià)連接,因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用多聚甲醛或甲醛等醛類固定劑,以及細(xì)胞通透的去垢劑Triton X-100等處理時(shí),線粒體的熒光標(biāo)記不會(huì)消失,但可能會(huì)有一定程度的下降(約下降2-10倍)。由于本熒光探針的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜與常見(jiàn)的綠色熒光探針重疊較少,因此非常適合用于熒光雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)。
可以用于活細(xì)胞的線粒體熒光染色,不適合用于固定后細(xì)胞或者組織的染色;但在用本產(chǎn)品標(biāo)記線粒體后,后續(xù)可以進(jìn)行固定和通透,并用其它探針進(jìn)行染色或進(jìn)行免疫熒光染色,但染色后再固定和通透,熒光強(qiáng)度會(huì)有一定的下降。而且不同的細(xì)胞,固定和通透的影響會(huì)有所區(qū)別,建議對(duì)固定和通透試劑、條件進(jìn)行一定的測(cè)試。
本產(chǎn)品僅包含非常微量的粉末,使用前請(qǐng)先離心數(shù)秒鐘,使微量粉末充分沉降到管底。
熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
使用本產(chǎn)品可以在常見(jiàn)的多孔板或培養(yǎng)皿中進(jìn)行熒光染色,也可以在蓋玻片或載玻片上進(jìn)行熒光染色。
線粒體紅色熒光探針
線粒體紅色熒光探針