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產(chǎn)品名稱(chēng):磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品型號(hào):BC3310

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶檢測(cè)試劑盒
PEPCK(EC 4.1.1.32)廣泛存在于動(dòng)物、開(kāi)花植物、藻類(lèi)、部分真菌和細(xì)菌中。該酶催化草酰乙酸轉(zhuǎn)化為磷酸烯醇式丙酮酸,是調(diào)節(jié)糖異生途徑的第1限速酶。PEPCK 催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和 CO2,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH 氧化生成 NAD+,在 340nm 下測(cè)定 NADH 下降速率,即可反映 PEPCK 活性。

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BC3310磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶檢測(cè)試劑盒

 

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
紫外分光光度法

注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
貨號(hào):BC3310
規(guī)格:50T/48S
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 45 mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑 35 mL×1 瓶,-20℃避光保存;臨用前加入 35mL 試劑一溶解??扇芙夂蠓盅b-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
試劑三:液體 45µL×1 支,4℃避光保存;臨用前加入蒸餾水按體積比 1:120 稀釋?zhuān)F(xiàn)用現(xiàn)配;
試劑四:液體 155µL×1 支,4℃避光保存;臨用前加入蒸餾水按體積比 7:250 稀釋?zhuān)F(xiàn)用現(xiàn)配;
試劑五:粉劑×1 瓶,-20℃避光保存;臨用前加入 2.5mL 蒸餾水充分溶解;可溶解后分裝-20℃保存,避免反復(fù)凍融。

產(chǎn)品說(shuō)明:
PEPCK(EC 4.1.1.32)廣泛存在于動(dòng)物、開(kāi)花植物、藻類(lèi)、部分真菌和細(xì)菌中。該酶催化草酰乙酸轉(zhuǎn)化為磷酸烯醇式丙酮酸,是調(diào)節(jié)糖異生途徑的第1限速酶。PEPCK 催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和 CO2,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH 氧化生成 NAD+,在 340nm 下測(cè)定 NADH 下降速率,即可反映 PEPCK 活性。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、1mL 石英比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。

操作步驟:
一、粗酶液提取:
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱(chēng)取約 0.1g 組織,加入1mL 提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后 8000g,4℃,離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。

二、測(cè)定步驟:
1、紫外分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng) 340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、工作液的配制:將試劑二、試劑三、試劑四按 7:1:1(V:V:V)的比例配制工作液,工作液現(xiàn)用現(xiàn)配。
3、將工作液置于 37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)預(yù)熱 5 分鐘。
4、操作表:在 1mL 石英比色皿中依次加入下列試劑:

相關(guān)文獻(xiàn):

《Hepatic c-Jun regulates glucose metabolism via FGF21 and modulates body temperature through the neural signals》 作者:FeiXiao15YajieGuo15JialiDeng1FeixiangYuan1YuzhongXiao1LijianHui2YuLi1ZhiminHu1YuncaiZhou3KaiLi3XiaoHan3QichenFang4WeipingJia4YanChen1HaoYing1QiweiZhai1ShanghaiChen1FeifanGuo 期刊:Molecular Metabolism 影響因子:6.181 PMID:30579932

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶檢測(cè)試劑盒

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