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產(chǎn)品名稱:組織及血液酸性磷酸酶(ACP)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品型號:BC2135

產(chǎn)品報(bào)價:

產(chǎn)品特點(diǎn):組織及血液酸性磷酸酶(ACP)活性檢測試劑盒
測定意義:ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機(jī)磷酸,常見于巨噬細(xì)胞的溶酶體內(nèi)。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。
測定原理:在酸性環(huán)境中,ACP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚,苯酚與4-氨基安替和鐵反應(yīng)生成紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測定510nm吸光度增加速率,來計(jì)算ACP活性。

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BC2135組織及血液酸性磷酸酶(ACP)活性檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

組織及血液酸性磷酸酶(ACP)活性檢測試劑盒

ACP 在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機(jī)磷酸,常見于巨噬細(xì)胞的溶酶體內(nèi)。ACP 常用于前列腺癌的輔助診斷。在酸性環(huán)境中,ACP 催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚,苯酚與 4-氨基安替和鐵反應(yīng)生成紅色亞醌衍生物,在 510nm 有特征光吸收;通過測定 510nm 吸光度增加速率,來計(jì)算 ACP 活性。

組織及血液酸性磷酸酶(ACP)活性檢測試劑盒

一、粗酶液提取: 稱取約 0.1g 組織,加提取液 1mL 充分研磨,4℃、10000rpm 離心 10min,取上清液待測。血液可直接用于測定,如果濃度高的話,用提取液稀釋。

二、測定步驟:

1.分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min 以上,調(diào)節(jié)波長到 510 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑一置于 37℃水浴中預(yù)熱 30 min 以上。試劑名稱(μL) 測定管 對照管 空白管 標(biāo)準(zhǔn)管蒸餾水 - - 20 - 1μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)品 - - - 20 上清液 20 - - - 試劑一 40 40 40 40 試劑二 40 40 40 40 混勻后置于 37℃水浴中保溫 15min 試劑三 120 120 120 120 上清液 - 20 - - 混勻后于 510 nm 測定吸光度,分別記為 A 測定管、A 對照管、A 空白管、A 標(biāo)準(zhǔn)管。

三、ACP 活性計(jì)算: 1.按蛋白濃度計(jì)算活性單位定義:37℃中每毫克蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1 μmol 酚。 ACP(U/mg pr)= [C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)×V 樣]÷(Cpr×V 樣)÷T = (A 測定管-A 對照管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管) ÷Cpr 2.按樣本鮮重計(jì)算活性單位定義:37℃中每克組織每分鐘催化產(chǎn)生 1 μmol 酚。 ACP 活力(U/g)= [C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)×V 樣] ÷(W÷V 提取×V 樣)÷T =0.067×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)÷W 3.血液中 ACP 活性計(jì)算活性單位定義:37℃中每毫升血液每分鐘催化產(chǎn)生 1μmol 酚。 ACP 活力(U)= [C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)×V 樣] ÷V 樣÷T =0.067×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管) C 標(biāo)準(zhǔn)品:1μmol/mL; V 樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積(mL),0.02mL;V 樣總:1mL; T:反應(yīng)時間(min),15 min;V 提取:加入提取液體積,1mL;W:樣本鮮重,g。

組織及血液酸性磷酸酶(ACP)活性檢測試劑盒

提取液:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。試劑一:液體 10mL×1 瓶,4℃避光保存。試劑二:液體 10mL×1 瓶,4℃避光保存。試劑三:液體 30mL×1 瓶,4℃避光保存,變成藍(lán)綠色不能使用。標(biāo)準(zhǔn)品:液體 1mL×1 支,1μmol/mL 酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存

 

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