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關(guān)于PCR，你知道多少？（四） ----幾種特殊的PCR
2025-10-13 1、錨定PCR（anchoredPCR）通常采用的PCR反應(yīng)必須知道欲擴(kuò)增的DNA或RNA片段兩側(cè)的序列，而在大多數(shù)情況下對(duì)某些序列本身或其旁側(cè)序列并不清楚，“錨定PCR”可以幫助克服序列未知或序列未知帶來(lái)的障礙?；咀龇ㄊ牵悍蛛x細(xì)胞總RNA或者mRNA，在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成cDNA，通過(guò)DNA末端轉(zhuǎn)移酶在cDNA3’末端加上poly（dG）尾巴。與此poly（dG）相對(duì)應(yīng)的錨定引物poly（dC）為保證擴(kuò)增特異性，建議此段旁聚（dC）在十二聚以上，5’端可帶上某些限制酶序...關(guān)于PCR，你知道多少？（三）----Taq DNA聚合酶
2025-10-13 ----TaqDNA聚合酶在PCR反應(yīng)中，毫無(wú)疑問(wèn)的DNA聚合酶是最關(guān)鍵的因素。PCR最初使用的DNA聚合酶是大腸桿菌DNA聚合酶I的Klenow片段。但該酶存在很多缺陷，使之不能廣為應(yīng)用，比如：熱穩(wěn)定性差，每次DNA熱變性后大部分酶都被滅活，需要重新加入，每個(gè)循環(huán)都要重新加入；Klenow酶反應(yīng)溫度較低，引物和模板容易形成非特異性配對(duì)，產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增。后來(lái)人們?cè)褂眠^(guò)T4DNA聚合酶和T7DNA聚合酶，兩者雖使擴(kuò)增特異性增加，且使DNA合成速度提高了，但是由于其對(duì)熱的穩(wěn)定...多聚-L-賴氨酸(Poly-L-Lysine)的原理、應(yīng)用及配置
2025-10-10 多聚賴氨酸一般常見(jiàn)的分子量有70，000~150，000，150，000~300，000和300，000，分子量越大，黏附力越強(qiáng)，但相對(duì)充分溶解較困難。原理：多聚賴氨酸溶液是廣泛應(yīng)用的組織切片與玻片黏合劑，該多聚陽(yáng)離子分子與組織切片上的陰離子相互作用會(huì)產(chǎn)生較強(qiáng)的黏合力。培養(yǎng)瓶表面的性質(zhì)對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)至關(guān)重要，細(xì)胞表面的糖蛋白（陰性）易于吸附在親水性的表面上，因而細(xì)胞培養(yǎng)表面如果有相當(dāng)含量的陽(yáng)性電荷更能促進(jìn)細(xì)胞吸附，這正是運(yùn)用多聚賴氨酸優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)表面的重要所在。應(yīng)用：適用組織學(xué)...儀器今天準(zhǔn)不準(zhǔn)？看心情？不，看TA！
2025-09-30 嘿，實(shí)驗(yàn)室的小伙伴們！是不是偶爾也會(huì)懷疑人生（哦不，是懷疑儀器）？明明步驟沒(méi)錯(cuò)，結(jié)果卻飄忽不定……儀器今天的心情，是“精準(zhǔn)模式”還是“隨緣模式”？別甩鍋儀器！90%的“不準(zhǔn)”，都是沒(méi)做對(duì)“校準(zhǔn)”——儀器就像精準(zhǔn)的鐘表，用久了難免“走偏”：滲透儀養(yǎng)細(xì)胞、測(cè)體液的科研人，滲透儀非常重要，但這臺(tái)儀器用久了就會(huì)“記錯(cuò)刻度”，導(dǎo)致檢測(cè)數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確。粘度計(jì)黏度計(jì)靠“液體流過(guò)毛細(xì)管的速度”計(jì)算結(jié)果，但管子里黏了殘留液、溫度變了點(diǎn)，速度就不準(zhǔn)了。pH計(jì)pH計(jì)的電極老化、接觸空氣久了，就會(huì)把pH...干貨分享 | 多姿多彩的“工具人”——熒光染料，點(diǎn)亮你的科研之路
2025-09-30 熒光染料是指吸收某一波長(zhǎng)的光波后能發(fā)射出另一波長(zhǎng)大于吸收光的光波的物質(zhì)。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料是生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的工具由于靈敏度高，操作方便，逐漸取代了放射性同位素作為檢測(cè)標(biāo)記，其廣泛應(yīng)用于熒光免疫，熒光探針，細(xì)胞染色等。包括特異性的DNA染色，用于染色體分析、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡等相關(guān)研究。另有很多核酸染料在多色染色系統(tǒng)中是非常有用的復(fù)染劑，可作為背景對(duì)照，標(biāo)記細(xì)胞核使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的空間關(guān)系一目了然。Solarbio小分子系列包含了多種具有高...高分文獻(xiàn)解讀|磷酸甘油酸脫氫酶通過(guò)穩(wěn)定蛋白激酶Cδ型mRNA促進(jìn)肝細(xì)胞癌進(jìn)展
2025-09-30 基本信息題目：PhosphoglyceratedehydrogenasestabilizesproteinkinaseCdeltatypemRNAtopromotehepatocellularcarcinomaprogression期刊：SignalTransductionａndTargetedTherapyIF:52.7PMID:40681503DOI:10.1038/s41392-025-02304-w通訊作者：汪凱、黃愛(ài)龍、唐霓通訊作者單位：重慶醫(yī)科大學(xué)文獻(xiàn)背景代謝重編...掃碼加微信，了解最新動(dòng)態(tài)
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